Kromatografi Cair (Liquid Chromatography)

Terdapat dua model operasional yang didasarkan pada polaritas relatif dari fase diam dan fase bergerak.

1. Normal phase Chromatograpy :
   Fase diam bersifat polar kuat dan fase gerak bersifat non-polar
   Misalnya : Silika = fase diam , n-hexane = fase gerak
2. Reversed phase Chromatography:
   Fase diam bersifat non-polar dan fase gerak bersifat polar.
   Misal : Hydrocarbon = fase diam, air = fase gerak

Gambar 18.21. menggambarkan kedua teknik tersebut menunjukkann elusi komponen sampel dengan polaritas berbeda.


Gambar 18.21. Ilustrasi kromatografi cair yang normal dan “reversed phase”.
Fase gerak dapat dipompakan ke dalam kolom dengan tiga cara :

1. Isokratik:aliran tetap (konstan) dan ketetapan komposisi dari fase gerak tetap berlaku.
2. Gradient Elution:aliran konstan dan perubahan komposisi dari fase gerak terjadi.
3. FlowProgram:aliran bervariasi dan ketetapan komposisi dari fase gerak terjadi.

Kromatografi Padat Cair (Adsorpsi) (Liquid Solid Chromatography)
Fase diam adalah adsorben dan pemisahan didasarkan pada adsorpsi berulang dan desorpsi bahan terlarut (analit). Bahan terlarut ditambahkan ke sistem padat (misal silika) cair (misal aseton).

Skala Polaritas Jenis-jenis Senyawa
(didasarkan pada kenaikan retensi)
Fluorocarbon
Hidrokarbon jenuh (saturated hydrocarbon)
Olefins
Aromatik
Senyawa halogen
Eter
Senyawa nitro
Ester = keton = aldehid
Alkohol = amina
Amida
Asam karbosilat (Carboxylic Acids)

Keseimbangan

Kromatografi Cair Cair (Liquid Liquid Chromatography)
Fase diam merupakan cairan (lebih baru-baru ini bonded phase) yang dilapiskan pada patana inert (bahan pendukung). Bahan terlarut ditambahkan ke dalam sistem yang mengandung dua pelarut yang tidak dapat dicampur dan memenuhi keseimbangan

Konstanta Partisi dihubungkan pada rasio partisi k’ via volume tiap fase oleh persamaan

High Performance Liquid Chromatograph (HPLC)


Kromatografi Penukar Ion (Ion Exchange Cromatography)
Fase diam berupa penukar kation maupun anion yang terdiri atas gel silika atau polimer dengan berat molekul tinggi dimana merupakan gugus ionik berikatan kimia,
Bahan terlarut (bersifat ionik) ditambahkan pada sistem pertukaran kation atau anion dengan polar eluan (misal air).
Mekanisme pemisahan berdasarkan pada daya tarik elektrostatik.

Kromatografi Pasangan Ion (Ion Pair Chromatography)
Dalam Ion Pair Chromatography dipilih sistem normal atau reversed phase dan counter ion ditambahkan pada eluan. Dalam kebanyakan kasus sistem reversed phase lebih disukai. Ion Pair Chromatographytelah digunakan untuk memisahkan sampel yang mengandung komponen ionik maupun non-ionik.
Saat ini terdapat dua kontroversi mengenai mekanisme pemisahan dan ada dua kubu kontroversi mendera satu mekanisme berikut:

• Bagian akhir counter-ion lipophilic diadsorbpsi ke fase diam dan pertukaran ion terjadi dalam cara normal (lihat atas)

• Analit dikombinasikan dengan counter ion dan mengambil bagian dalam kromatografi sebagai pasangan ion